棉塞上包一层牛皮纸，扎紧，即可进行灭菌。

    将上述培养基以0.1mpa，121c，高压蒸汽灭菌20min。

    搁置斜面：将灭菌的试管培养基管口端搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长度的一半为宜。

    随后

    在无菌工作台上，用孢子或者将采集到的野生蘑菇浸入0.1%的升汞水中浸泡1分钟，捞出用无菌水（高压灭菌过的）漂洗3遍。

    将表面消毒过的蘑菇用无菌刀片切去表皮，切成黄豆大小的菇肉块，用镊子将菇肉块放入斜面试管的培养基上，快速塞好棉塞。

    最终

    将接种好的斜面试管放置在25c下培养至菌丝爬满斜面。将此斜面菌种再转接几次斜面试管扩大培养后，得到的母种即可用于制作二级菌种即原种了。

    培育二级种

    依然是消毒，配置培养基，其两项，是主要培植从母种至栽培种工序的核心。

    培养基的成分，一般由木屑、棉籽壳、废棉、稻草、甘蔗渣、玉米芯、玉米秸秆、花生壳、豆秆粉等原料，任用其一种，都可以栽培。但要获得高产、优质的栽培效果，则应添加适量麸皮、米糠
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